FluorCam1300植物多光譜熒光成像系統(tǒng)是FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)的最新高級(jí)擴(kuò)展產(chǎn)品。此系統(tǒng)既可用于PAM脈沖調(diào)制式葉綠素?zé)晒鈩?dòng)態(tài)成像分析,，又可用于UV紫外光對(duì)植物葉片激發(fā)產(chǎn)生的多光譜熒光成像測(cè)量分析,，還可選配濾波器組對(duì)GFP、RFP,、YFP,、SYBR Green等熒光蛋白和熒光染料進(jìn)行穩(wěn)態(tài)熒光成像測(cè)量,。測(cè)量對(duì)象包括葉片,、果實(shí)、花朵,、整株擬南芥或其他小型植株,、苔蘚、微藻,、大型藻類乃至特定的動(dòng)物樣品,。
應(yīng)用領(lǐng)域：
- 植物光合生理生態(tài)
- 植物逆境脅迫生理與易感性
- 植物初級(jí)代謝與次級(jí)代謝
- 植物表型組學(xué)成像分析（Phenotyping）
- 作物遺傳育種與抗性篩選
- 種子萌發(fā)與活力監(jiān)測(cè)
- 轉(zhuǎn)基因植株篩選
功能特點(diǎn)：
- 多激發(fā)光-多光譜熒光成像技術(shù)：通過(guò)兩種以上不同波長(zhǎng)的光源激發(fā)植物樣品中不同的發(fā)色團(tuán)發(fā)出熒光并進(jìn)行成像檢測(cè)，即為多激發(fā)光多光譜熒光成像技術(shù),。植物的多光譜熒光主要包括葉綠素?zé)晒?、UV紫外光激發(fā)多光譜熒光和熒光蛋白熒光
- FluorCam1300無(wú)需更換任何配件即可同步實(shí)現(xiàn)多激發(fā)光-多光譜熒光成像功能：
- PAM脈沖調(diào)制式葉綠素?zé)晒獬上?/span>
- 紫外激發(fā)F440、F520,、F690,、F740多光譜熒光成像
- GFP,、RFP、YFP等常用熒光蛋白成像
- 可根據(jù)用戶需要定制熒光蛋白或熒光染料成像,，如BFP,、CFP、SYBR Green,、DAPI等
- 可選配定制對(duì)黃酮,、花青素含量的定量測(cè)量
- 可進(jìn)行自動(dòng)重復(fù)成像測(cè)量和無(wú)人值守監(jiān)測(cè)，可設(shè)置實(shí)驗(yàn)程序（Protocols）自動(dòng)循環(huán)成像測(cè)量,，成像測(cè)量數(shù)據(jù)自動(dòng)按時(shí)間日期存入計(jì)算機(jī)（帶時(shí)間戳）
- 測(cè)量樣品為各種活體植物樣品,，包括葉片、花卉,、果實(shí),、整株擬南芥或其他小型植物、微藻（包括液滴,、多孔板,、固體培養(yǎng)基）及大型藻類等
技術(shù)指標(biāo)：
- 一體式設(shè)計(jì)，自帶暗適應(yīng)箱體
- 最佳成像面積：20×20cm
- 最大樣品高度：20cm-100cm
- 測(cè)量參數(shù)：Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm', Fv/ Fm, Fv', Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qL, QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多個(gè)葉綠素?zé)晒鈪?shù),；紫外激發(fā)多光譜熒光成像參數(shù)：F440,、F520、F690,、F740,；熒光蛋白熒光強(qiáng)度參數(shù)Ft；每項(xiàng)參數(shù)均可顯示對(duì)應(yīng)二維熒光彩色圖像,。并可測(cè)量計(jì)算黃酮醇指數(shù)Flavonol Index,、花青素指數(shù)Anthocyanin Index（選配定制）。
- 具備完備的自動(dòng)測(cè)量程序（protocol）,，可自由對(duì)自動(dòng)測(cè)量程序進(jìn)行編輯
- Fv/Fm：測(cè)量參數(shù)包括Fo,，F(xiàn)m，F(xiàn)v,，QY等葉綠素?zé)晒鈪?shù)
- Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)：Fo,，F(xiàn)p，F(xiàn)v,，F(xiàn)t_Lss,，QY，Rfd等葉綠素?zé)晒鈪?shù)
- Quenching熒光淬滅分析：Fo,，F(xiàn)m,，F(xiàn)p，F(xiàn)s，F(xiàn)v,，QY,，ΦII，NPQ,，Qp,，Rfd，qL等50多個(gè)葉綠素?zé)晒鈪?shù)
- Light Curve光響應(yīng)曲線：不同光強(qiáng)梯度條件下Fo,，F(xiàn)m,，QY，QY_Ln,，ETR等葉綠素?zé)晒鈪?shù)
- MultiColor紫外激發(fā)多光譜熒光成像（選配）
- FPs熒光蛋白成像：GFP,、YFP、RFP,、BFP等（選配）
- 熒光激發(fā)光源組：全LED光源,，包括紅光、冷白光,、遠(yuǎn)紅光,、紫外光，品藍(lán)光,，藍(lán)光,，青光，綠光,，琥珀色光等
- 高分辨率CCD相機(jī)
- 圖像分辨率：1360×1024像素
- 時(shí)間分辨率：在最高圖像分辨率下可達(dá)每秒20幀
- 具備7位濾波輪,，標(biāo)配葉綠素?zé)晒鉃V波器，根據(jù)用戶需要可定制紫外激發(fā)多光譜熒光和GFP,、RFP,、YFP、BFP等熒光蛋白專用濾波器
- FluorCam葉綠素?zé)晒獬上穹治鲕浖δ埽壕週ive（實(shí)況測(cè)試）,、Protocols（實(shí)驗(yàn)程序選擇定制）,、Pre–processing（成像預(yù)處理）、Result（成像分析結(jié)果）等功能菜單
- 自動(dòng)測(cè)量分析功能：可設(shè)置一個(gè)實(shí)驗(yàn)程序（Protocol）自動(dòng)無(wú)人值守循環(huán)成像測(cè)量,，重復(fù)次數(shù)及間隔時(shí)間客戶自定義,，成像測(cè)量數(shù)據(jù)自動(dòng)按時(shí)間日期存入計(jì)算機(jī)（帶時(shí)間戳）
- 成像預(yù)處理：程序軟件可自動(dòng)識(shí)別多個(gè)植物樣品或多個(gè)區(qū)域,，也可手動(dòng)選擇區(qū)域（Region of interest,，ROI）。手動(dòng)選區(qū)的形狀可以是方形,、圓形,、任意多邊形或扇形。軟件可自動(dòng)測(cè)量分析每個(gè)樣品和選定區(qū)域的熒光動(dòng)力學(xué)曲線及相應(yīng)參數(shù)，樣品或區(qū)域數(shù)量不受限制（>1000）
- 輸出結(jié)果：高時(shí)間解析度熒光動(dòng)態(tài)圖,、熒光動(dòng)態(tài)變化視頻,、熒光參數(shù)Excel文件、直方圖,、不同參數(shù)成像圖,、不同ROI的熒光參數(shù)列表等
應(yīng)用案例：
- 抗病毒基因研究：葉綠素?zé)晒獬上衽cGFP成像聯(lián)合分析
法國(guó)國(guó)家農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院一直致力于馬鈴薯y病毒組的抗病基因研究，通過(guò)不同基因編輯處理方法,，驗(yàn)證抗病毒分子機(jī)制,。相關(guān)研究中，研究人員利用FluorCam多光譜熒光成像系統(tǒng)的GFP熒光蛋白成像功能,，定量分析感染面積與病毒積累量,，從而直觀地反映了不同基因功能對(duì)擬南芥病毒抗性的影響。同時(shí),，葉綠素?zé)晒獬上駝t反映病毒對(duì)光合系統(tǒng)的損傷,，同步提供植物的光合表型信息。
參考文獻(xiàn)：
- Zafirov D, et al. 2021. When a knockout is an Achilles' heel: Resistance to one potyvirus species triggers hypersusceptibility to another one in Arabidopsis thaliana. Mol Plant Pathol. 22: 334–347
- Bastet A, et al. 2019. Mimicking natural polymorphism in eIF4E by CRISPR‐Cas9 base editing is associated with resistance to potyviruses. Plant Biotechnology Journal 17: 1736–1750
- Bastet A, et al. 2018. Trans-species synthetic gene design allows resistance pyramiding and broad-spectrum engineering of virus resistance in plants. Plant Biotechnology Journal: 1–13
產(chǎn)地：歐洲
