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技術(Technology)
FluorCam多光譜熒光成像系統(tǒng)

時間:2018-11-14

作者:易科泰

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簡介:

FluorCam植物多光譜熒光成像系統(tǒng)

FluorCam多光譜熒光成像系統(tǒng)是國際知名FluorCam葉綠素熒光成像技術的高級擴展產品,,可用于葉綠素熒光動態(tài)成像分析,、多激發(fā)光光合效率成像分析,、紫外光激發(fā)多光譜熒光成像分析,、PAR吸收與NDVI(植物光譜反射指數)成像分析,、GFP/YFP穩(wěn)態(tài)熒光成像等,,全面,、非接觸、高靈敏度反映植物生理生態(tài),、脅迫生理與抗性,、光合效率等,廣泛應用于植物表型成像分析,、植物脅迫與抗性檢測,、植物病害與病例檢測研究、遺傳育種高通量篩選,、植物生理生態(tài)學,、植物初級代謝與刺激代謝研究,、污染生態(tài)學研究檢測/生物檢測等。

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主要功能特點:

ü葉綠素熒光成像分析:植物光合效率,、熒光淬滅熱散失、光響應曲線,、植物脅迫與抗性等生理功能測量檢測

ü多光譜熒光成像分析:反映多酚與黃酮類等次級代謝產物動態(tài)變化,、葉綠素動態(tài)變化、植物衰老,、植物病蟲害脅迫及非生物脅迫等

üGFP/YFP穩(wěn)態(tài)熒光成像:遺傳育種,、基因標記

üNDVI成像分析:N素營養(yǎng)狀態(tài)、植物脅迫等

ü  2.jpgUV紫外光激發(fā)多光譜熒光成像技術: UV紫外光對植物葉片激發(fā),,可以產生具有4個特征性波峰的熒光光譜,,4個波峰的波長為藍光440nm(F440)、綠光520nm(F520),、紅光690nm(F690)和遠紅外740nm(F740),,其中F440和F520統(tǒng)稱為BGF,由表皮及葉肉細胞壁和葉脈發(fā)出,,F690和F740為葉綠素熒光Chl-F,。紫外光激發(fā)多光譜熒光可以用來靈敏、特異性地評估植物生理狀態(tài)包括受脅迫狀態(tài),,包括干旱,、病蟲害、環(huán)境污染,、氮脅迫等

ü多激發(fā)光,、多光譜熒光成像技術:通過光學濾波器技術,僅使特定波長的光(激發(fā)光)到達樣品以激發(fā)熒光,,同時僅使特定波長的激發(fā)熒光到達檢測器,。不同的熒光發(fā)色團(如葉綠素或GFP綠色熒光蛋白等)對不同波長的激發(fā)光“敏感”并吸收后激發(fā)出不同波長的熒光,根據此原理可以選配2個或2個以上的激發(fā)光源,、濾波輪及相應濾波器,,對不同波長熒光(多光譜熒光)進行成像分析。如選配紅光和藍光及相應濾波器,,可以對GFP和葉綠素熒光成像分析,,還可選配綠色光源及相應濾波器,以對YFP進行熒光成像分析等,;

ü可選配不同規(guī)格型號,,以實現不同均一植物熒光成像面積:13x13cm、20x20cm及35x35cm,,可對葉片或整株植物甚至多株植物進行實驗成像分析

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ü可進行自動重復成像測量和無人值守監(jiān)測,,可設置兩個實驗程序(Protocols)自動循環(huán)成像測量,,成像測量數據自動按時間日期存入計算機(帶時間戳)

ü帶有Kautsky誘導效應、熒光淬滅分析,、GFP穩(wěn)態(tài)熒光成像及紫外光激發(fā)多光譜熒光成像分析等各種通用實驗程序(protocols),,測量分析參數達60多個

ü可選配RGB成像、紅外熱成像及高光譜成像,,以便與葉綠素熒光成像融合分析,,全面研究分析形態(tài)結構、顏色,、氣孔導度,、植物光譜特征、WUE(水分利用效率),、CWSI(水分脅迫指數),、植物生理生化等

ü測量樣品包括葉片、花卉,、果實,、根系、植物其它組織及整株植物,、藻類,、小型動物等

配置規(guī)格:

1)一體式:可進行葉綠素熒光成像分析及UV紫外光源激發(fā)4個波段的熒光成像分析,成像面積13 x 13cm,,系統(tǒng)高度集成(整體配置于一個一體式暗適用操作箱內),、方便使用,具備7位濾波輪及多光譜熒光成像濾波器組,、高分辨率CCD鏡頭,、UV紫外光激發(fā)多光譜熒光成像功能模塊及程序軟件等;具體又有如下幾種功能配置:

a)FluorCam多光譜熒光成像(標準配置)

b)FluorCam多光譜熒光成像+GFP熒光成像

c)FluorCam多光譜熒光成像+QA再氧化+OJIP成像分析系統(tǒng)

d)FluorCam多光譜熒光成像+GFP熒光+QA再氧化+OJIP成像分析系統(tǒng)

2)模塊式:模塊式結構,,具備高度可擴展性,,不僅可進行葉綠素熒光成像分析及UV紫外光源激發(fā)4個波段的熒光成像分析,還可進行PAR吸收及NDVI成像分析,、GFP綠色熒光蛋白等穩(wěn)態(tài)熒光成像分析(選配),,可根據客戶需求選配不同的激發(fā)光源和濾波器組合,標配成像面積13 x 13cm,,大型版成像面積20x20cm,;

3)落地式:為大型多光譜熒光成像平臺,均一植物熒光成像面積可達35x35cm,,可進行葉綠素熒光成像,、BGF成像、PAR吸收率成像,、NDVI成像,、GFP成像等

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技術指標:

?標準版成像面積達13x13cm,,大型版成像面積達20x20cm或35x35cm,紅外熱成像,、高光譜成像面積以物距大小而定,,小到植物葉片、大到植物冠層乃至大片植物冠層成像分析

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?標準配置含濾波輪,、ChlF.濾波器及高分辨率鏡頭,,測量參數包括Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, QY, QY_Ln, PARabs, Rfd,BGF,,UV-Chl.F等60多個葉綠素熒光參數和穩(wěn)態(tài)熒光

?紫外光激發(fā)多光譜熒光參數包括F440、F520,、F690,、F740

?高分辨率CCD鏡頭

n最高圖像分辨率:1360×1024像素

n時間分辨率:在最高圖像分辨率下可達每秒20幀

nA/D 轉換分辨率:16位(65536灰度色階)

n像元尺寸:6.45μm×6.45μm

?配置有通用葉綠素熒光成像測量實驗程序(protocols)和穩(wěn)態(tài)熒光測量程序(選配),包括Fv/Fm Protocol,,Kautsky誘導效應Protocol,,熒光淬滅分析 Protocol,MCF多光譜熒光,,穩(wěn)態(tài)熒光測量,,光響應曲線及PAR吸收成像測量等

?4個13x13cm LED光源板(大型版為4個20x20cm光源板,大型平臺為整體式70x70cm光源板),,雙色光源(2紅橙光+2藍光),,雙色光化學光(Actinic light1和Actinic light2)

?標配Actinic1光強300μmol(photons)/m2.s ,Actinic2光強2000μmol(photons)/m2.s,,飽和光閃4000μmol(photons)/m2.s

?標配測量光為617nm紅光,,其它波段可選,持續(xù)時間10μs - 100μs可調,;

?UV紫外光源板:380nm紫外LED光源板,,配備專用光源濾波片,用于激發(fā)植物樣品多光譜熒光

?7位濾波輪及濾波器,,用于成像測量葉綠素熒光,、F440、F520,、F690,、F740及GFP等穩(wěn)態(tài)熒光(GFP熒光需選配相應功能模塊)

?可選配遠紅光735nm(FAR)與650nm雙色LEDs光源板及相應濾波器和功能程序模塊,用于測量Fo’,、PARabs及NDVI

?可選配1對青色LEDs光源板及相應濾波器等,,可用于氣孔功能測量研究

?可選配1對綠色LEDs光源板用于測量YFG(須選配相應濾波器等)

?如測量其它熒光參數,須選配相應濾波器等(請咨詢EcoTech實驗室),,以下為選配參考:

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?FluorCam葉綠素熒光成像分析軟件功能:具Live(實況測試),、Protocols(實驗程序選擇定制),、Pre–processing(成像預處理)、Result(成像分析結果)等功能菜單

?客戶定制實驗程序協議(protocols):可設定時間(如測量光持續(xù)時間,、光化學光持續(xù)時間,、測量時間等)、光強(如不同光質光化學光強度,、飽和光閃強度,、調制測量光等),具備專用實驗程序語言和腳本,,用戶也可利用Protocol菜單中的向導程序模版自由創(chuàng)建新的實驗程序

?自動測量分析功能:可設置一個實驗程序(Protocol)自動無人值守循環(huán)成像測量,,重復次數及間隔時間客戶自定義,成像測量數據自動按時間日期存入計算機(帶時間戳)

?快照(snapshot)模式:通過快照成像模式,,可以自由調節(jié)光強,、快門時間及靈敏度得到清晰突出的植物樣本穩(wěn)態(tài)熒光和瞬時熒光圖片

?成像預處理:程序軟件可自動識別多個植物樣品或多個區(qū)域,也可手動選擇區(qū)域(Region of interest,,ROI),。手動選區(qū)的形狀可以是方形、圓形,、任意多邊形或扇形,。軟件可自動測量分析每個樣品和選定區(qū)域的熒光動力學曲線及相應參數,樣品或區(qū)域數量不受限制(>1000)

?數據分析模式:具備“信號計算再平均”模式(算數平均值)和“信號平均再計算”模式,,在高信噪比的情況下選用“信號計算再平均”模式,,在低信噪比的情況下選擇“信號平均再計算”模式以過濾掉噪音帶來的誤差

?給光制度:靜態(tài)或動態(tài)

?Bios固件可升級

?通訊方式:千兆以太網

?供電電壓:90 – 240 V

下圖為植物接種病毒(PMMoV-I為意大利菌株,PMMoV-S為西班牙菌株)后(dpi為接種后的侵染天數)的紫外光激發(fā)多光譜熒光成像,,其中Abaxial為葉片背面成像,,Adaxial為葉片正面成像(引自Monica Pineda等,2008)

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產地:歐洲

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