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— 生態(tài) · 農業(yè) · 健康 —
應用(Application)
FluorTron?多功能高光譜成像分析技術——解碼生物熒光

時間:2023-08-18

作者:易科泰

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簡介:

 

生物熒光現象蘊含豐富的生命信息,,如葉綠素熒光可以反映植物的光合作用生理狀態(tài),、植物次級代謝產物熒光可以反映生物活性成分含量分布及其環(huán)境響應等等,但由于極其微弱,,往往很難被發(fā)現和定性定量研究,。易科泰生態(tài)技術公司長期致力于農業(yè)-生態(tài)-健康領域先進儀器技術引進推廣、研發(fā)集成及應用創(chuàng)新服務,,基于近二十年葉綠素熒光測量與成像技術,、紫外光激發(fā)多光譜熒光成像技術服務與實驗研究,及近幾年來高光譜成像技術創(chuàng)新應用研究實驗(SpectrAPP?項目),,推出FluorTron?多功能高光譜成像分析系統(tǒng),,為生物樣品實驗室高光譜成像分析、熒光成像分析及光譜分析提供非接觸,、非損傷,、高通量、數字化,、可視化研究檢測解決方案,。

 

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左圖:FluorTron?多功能高光譜成像分析系統(tǒng)右圖:番茄葉片葉綠素熒光成像

 

主要功能特點

1) 多激發(fā)光葉綠素熒光高光譜成像分析,,葉綠素熒光成像分析與熒光光譜分析,,全面解析植物(包括藻類)光合生理生化信息

2) UV-MCF紫外光激發(fā)生物熒光高光譜成像分析,,同步成像分析葉綠素熒光,、藍綠熒光空間異質性分布及生物熒光光譜特征,。其中藍綠熒光通常有藍色和綠色兩個峰值,由表皮,、葉肉細胞壁和葉脈發(fā)出(指示次級代謝產物等),;葉綠素熒光有F690紅色和F740遠紅兩個顯著的峰值,反映植物光合生理狀態(tài),。UV-MCF可以用來靈敏,、特異性地評估植物生理狀態(tài)包括受脅迫狀態(tài)如干旱、病蟲害,、環(huán)境污染,、氮脅迫等

3) (反射光)高光譜成像分析

4) 可選配GFP、熒光素酶等生物活體熒光成像,,用于轉基因標記等

5) 可選配成像室溫控系統(tǒng)及溫控載物臺

6) FluorVision專業(yè)熒光成像分析軟件

 

應用領域

? 植物表型成像分析,,特別適合葉片、種苗,、根系等表型成像分析

? 種質資源研究檢測鑒定,,包括種子活力、萌發(fā)檢測,、種子分撿模型構建,、種質資源數字化等,可同時采集構建種子反射光光譜指紋和熒光光譜指紋

? 作物遺傳育種,,如作物脅迫檢測與生理生態(tài)研究分析,、抗性篩選、高光效優(yōu)良品種篩選等

? 智慧農業(yè),、光生物學研究,,采后生物學研究

? 食品、中藥材品質檢測鑒定,,珍貴中藥材光譜指紋(包括反射光光譜指紋和熒光光譜指紋),,劣質或摻假檢測等

? 環(huán)境科學研究,如污染生態(tài)學,、環(huán)境毒理學研究檢測分析等

 

產品特點

a) 集多激發(fā)光葉綠素熒光成像,、UV-MCF生物熒光成像技術,圖譜合一解碼生物熒光現象

b) 可同時進行(反射光)高光譜成像,,在空間維度(形影圖像)和光譜維度上對物體表面反射光信息和生物熒光信息成像,,全面可視化分析其理化性質、生化組分,、生理狀態(tài)(如作物光合效率,、病蟲害脅迫、抗性等),,變不可見為可見

c) 基于高光譜成像技術的紫外光激發(fā)生物熒光光譜成像分析,,可同時獲得藍色,、綠色、紅色及遠紅波段的熒光成像,,不僅可對生物熒光如次級代謝產物(如多酚,、黃酮類、阿魏酸等)熒光和葉綠素熒光在二維尺度上進行成像分析,,還可以獲得熒光光譜特征(光譜指紋)并在高光譜維度上(多達幾百個)進行熒光光譜分析

 

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上圖為銀杏葉高光譜熒光成像(自左至右依次為:彩色成像,、綠色熒光F533成像、UV-MCF熒光光譜,。易科泰光譜成像實驗室提供)

 

d) 可對綠色熒光蛋白(GFP),、紅色熒光蛋白(RFP)、熒光素酶等進行成像檢測(選配)

e) 可進行多激發(fā)光(藍色,、綠色及紅色激發(fā)光)植物熒光光譜成像分析,,并進一步成像分析花青素指數、葉綠素指數,、黃酮指數等及氮素指數,,分析反映植物光合作用、生理生化狀況及脅迫等現象

f) 高光譜反射光譜成像分析,,標配 400-1000nm,,選配900-1700nm,可成像分析植物生理生化指標,、光利用效率,、健康指數、覆蓋度,、脅迫,、水分等近百種參數

g) SpectrAPP高光譜成像分析軟件及FluorVision高光譜熒光成像分析軟件,可進行光譜融合,、ROI選區(qū)分析,、光譜分析、頻率直方圖,、自動識別不同波段峰值并分析其比值等

 

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h) 物聯網+5G通信技術,,星型組網,具備強大的擴展功能,,可實現遠程控制

i) 嵌入式操作系統(tǒng),,觸摸屏+電腦端軟件雙重控制,無線操控,,支持自定義程序,,自動運行

j) 基于機器視覺技術、深度學習算法及人工智能馴化模型,,實現在線分析,、實時輸出結果

 

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分析參數

1) 藍綠熒光Fb(或F440)和Fg(或F520)等

2) 葉綠素熒光Fr(或F690)和Ffr(或F740)等

3) 熒光比值,,如Fb/Fg、Fb/Fr,、Fb/Ffr、Fr/Ffr等,,及F730-740/F680-690(反應葉綠素含量及植物長期脅迫等),、F735/F700(可精確反映葉綠素含量)

4) 通過PLSR等算法建立基于生物熒光光譜的檢測模型,用于早期診斷植物生物脅迫(如病蟲害)與非生物脅迫(如干旱脅迫等),、抗性篩選

5) 花青素指數(log(Ffr_R/Ffr_G)),、黃酮指數(log(Ffr_R/Ffr_UV)及氮素平衡指數NBI

6) 高光譜成像分析,可自動分析計算NDVI,、NDVI705紅邊歸一化植被指數(對衰老敏感),、VOG1紅邊指數(對葉綠素濃度、物候變化等敏感),、PRI光化學植被指數,、PSRI 植被衰減指數(用于指示冠層脅迫、植物衰老,、果實成熟等),、SIPI結構不敏感色素指數(反映冠層脅迫程度、生理脅迫檢測等),、CRI1 類胡蘿卜素反射指數,、ARI1/ ARI2 花青素反射指數、CI 葉綠素指數(紅邊指數),、WBIR水波段指數(反映水分含量分布),、HI健康指數等植物色素指數和脅迫敏感指數、NPQI歸一化脫鎂指數(用于早期脅迫檢測),、PSSRa(R800/R680)指數等

 

應用案例

1)植物對敵草隆的熒光響應

 

敵草隆處理烏蘞莓實驗:左圖左上角和右下角為實驗組(葉柄浸藥),、右上角和左下角為對照組,可以看出實驗組的葉柄和葉脈最大光量子產量QY_max明顯降低(藍色),;右圖為其葉綠素熒光光譜,,實驗組葉綠素熒光明顯高于對照組(易科泰SpectrAPP光譜成像實驗室提供)

 

2)中藥材檢測鑒定

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不同品種及產地的西洋參、甘草,、黃芪檢測分析,,兩種西洋參表現出最強的生物熒光,反映其含的活性次級代謝產物成分含量最高

(易科泰SpectrAPP光譜成像實驗室提供)

 

(3)人參熱脅迫早期診斷

 

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上左圖:熱敏感型和熱抗性(熱不敏感)人參品種RGB,;上右圖不同處理人參品種熒光光譜,。下圖:熒光光譜分析結果,通過PLSR模型構建,,可以明確區(qū)分熱敏感型人參熱脅迫前后的變化(a,、b為熱脅迫前,,cf為熱脅迫處理后),;c,、dgh分別為熱抗性人參品種熱脅迫處理前后

(引自:M.A.Faqeerzada etc. Fluorescence hyperspectral imaging for early diagnosis of heat-stressed Ginseng Plant, Applied Sciences, 2023

 

 

 

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