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  FluorCam-Pro植物多光譜熒光成像系統(tǒng)是FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)的最新高級(jí)擴(kuò)展產(chǎn)品,。此系統(tǒng)既可用于PAM脈沖調(diào)制式葉綠素?zé)晒鈩?dòng)態(tài)成像分析,，又可用于UV紫外光對(duì)植物葉片激發(fā)產(chǎn)生的多光譜熒光成像測(cè)量分析,，還可選配濾波器組對(duì)GFP,、RFP、YFP,、SYBR Green等熒光蛋白和熒光染料進(jìn)行穩(wěn)態(tài)熒光成像測(cè)量,。測(cè)量對(duì)象包括葉片、果實(shí),、花朵,、整株擬南芥或其他小型植株、苔蘚,、微藻,、大型藻類乃至特定的動(dòng)物樣品。

 

 

應(yīng)用領(lǐng)域：

• 植物光合生理生態(tài)
• 植物逆境脅迫生理與易感性
• 植物初級(jí)代謝與次級(jí)代謝
• 植物表型組學(xué)成像分析（Phenotyping）
• 作物遺傳育種與抗性篩選
• 種子萌發(fā)與活力監(jiān)測(cè)
• 轉(zhuǎn)基因植株篩選

 

功能特點(diǎn)：

• 多激發(fā)光-多光譜熒光成像技術(shù)：通過兩種以上不同波長(zhǎng)的光源激發(fā)植物樣品中不同的發(fā)色團(tuán)發(fā)出熒光并進(jìn)行成像檢測(cè),，即為多激發(fā)光多光譜熒光成像技術(shù),。植物的多光譜熒光主要包括葉綠素?zé)晒狻?/span>UV紫外光激發(fā)多光譜熒光和熒光蛋白熒光
• FluorCam-Pro無需更換任何配件即可同步實(shí)現(xiàn)多激發(fā)光-多光譜熒光成像功能：

?  PAM脈沖調(diào)制式葉綠素?zé)晒獬上?/span>

?  紫外激發(fā)F440、F520,、F690,、F740多光譜熒光成像

?  GFP、RFP,、YFP等常用熒光蛋白成像

• 可根據(jù)用戶需要定制熒光蛋白或熒光染料成像,，如BFP,、CFP、SYBR Green,、DAPI等
• 可對(duì)黃酮,、花青素含量進(jìn)行定量測(cè)量
• 可進(jìn)行自動(dòng)重復(fù)成像測(cè)量和無人值守監(jiān)測(cè)，可設(shè)置實(shí)驗(yàn)程序（Protocols）自動(dòng)循環(huán)成像測(cè)量,，成像測(cè)量數(shù)據(jù)自動(dòng)按時(shí)間日期存入計(jì)算機(jī)（帶時(shí)間戳）
• 測(cè)量樣品為各種活體植物樣品,，包括葉片、花卉,、果實(shí),、整株擬南芥或其他小型植物、微藻（包括液滴,、多孔板,、固體培養(yǎng)基）及大型藻類等

 

 

RFP熒光蛋白熒光：通過RFP熒光標(biāo)記確定轉(zhuǎn)基因表達(dá)位置，并對(duì)表達(dá)量進(jìn)行定量分析（以上成像圖均由易科泰EcoTech?實(shí)驗(yàn)室提供）

 

技術(shù)指標(biāo)：

• 一體式設(shè)計(jì),，自帶暗適應(yīng)箱體
• 最佳成像面積：20×20cm
• 測(cè)量參數(shù)：Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm', Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qL, QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多個(gè)葉綠素?zé)晒鈪?shù),；紫外激發(fā)多光譜熒光成像參數(shù)：F440、F520,、F690,、F740；熒光蛋白熒光強(qiáng)度參數(shù)Ft,；每項(xiàng)參數(shù)均可顯示對(duì)應(yīng)二維熒光彩色圖像,。并可測(cè)量計(jì)算黃酮醇指數(shù)Flavonol Index,、花青素指數(shù)Anthocyanin Index,。
• 具備完備的自動(dòng)測(cè)量程序（protocol）,，可自由對(duì)自動(dòng)測(cè)量程序進(jìn)行編輯

1) Fv/Fm：測(cè)量參數(shù)包括Fo，Fm,，Fv,，QY等葉綠素?zé)晒鈪?shù)

2) Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)：Fo，Fp,，Fv,，Ft_Lss，QY,，Rfd等葉綠素?zé)晒鈪?shù)

3) Quenching熒光淬滅分析：Fo,，Fm，Fp,，Fs,，Fv，QY,，ΦII,，NPQ,，Qp,，Rfd,，qL等50多個(gè)葉綠素?zé)晒鈪?shù)

4) Light Curve光響應(yīng)曲線：不同光強(qiáng)梯度條件下Fo，Fm,，QY,，QY_Ln，ETR等葉綠素?zé)晒鈪?shù)

5) MultiColor紫外激發(fā)多光譜熒光成像（選配）

6) FPs熒光蛋白成像：GFP,、YFP,、RFP、BFP等（選配）

 

 

• 熒光激發(fā)光源組：全LED光源,，包括620nm紅光,、5700K冷白光、735nm遠(yuǎn)紅光,、365nm紫外光,，445nm品藍(lán)光，470nm藍(lán)光,，505nm青光,，530nm綠光，590nm琥珀色光等

 

 

• 高分辨率CCD相機(jī)

1) 圖像分辨率：1360×1024像素

2) 時(shí)間分辨率：在最高圖像分辨率下可達(dá)每秒20幀

• 具備7位濾波輪,，標(biāo)配葉綠素?zé)晒鉃V波器,，根據(jù)用戶需要可定制紫外激發(fā)多光譜熒光和GFP、RFP,、YFP,、BFP等熒光蛋白專用濾波器
• FluorCam葉綠素?zé)晒獬上穹治鲕浖δ埽壕?/span>Live（實(shí)況測(cè)試）、Protocols（實(shí)驗(yàn)程序選擇定制）,、Pre–processing（成像預(yù)處理）,、Result（成像分析結(jié)果）等功能菜單
• 自動(dòng)測(cè)量分析功能：可設(shè)置一個(gè)實(shí)驗(yàn)程序（Protocol）自動(dòng)無人值守循環(huán)成像測(cè)量，重復(fù)次數(shù)及間隔時(shí)間客戶自定義,，成像測(cè)量數(shù)據(jù)自動(dòng)按時(shí)間日期存入計(jì)算機(jī)（帶時(shí)間戳）
• 成像預(yù)處理：程序軟件可自動(dòng)識(shí)別多個(gè)植物樣品或多個(gè)區(qū)域,，也可手動(dòng)選擇區(qū)域（Region of interest，ROI）,。手動(dòng)選區(qū)的形狀可以是方形,、圓形、任意多邊形或扇形,。軟件可自動(dòng)測(cè)量分析每個(gè)樣品和選定區(qū)域的熒光動(dòng)力學(xué)曲線及相應(yīng)參數(shù),，樣品或區(qū)域數(shù)量不受限制（>1000）

 

 

• 輸出結(jié)果：高時(shí)間解析度熒光動(dòng)態(tài)圖、熒光動(dòng)態(tài)變化視頻,、熒光參數(shù)Excel文件,、直方圖,、不同參數(shù)成像圖、不同ROI的熒光參數(shù)列表等

 

應(yīng)用案例：

1. 抗病毒基因研究：葉綠素?zé)晒獬上衽cGFP成像聯(lián)合分析

法國(guó)國(guó)家農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院一直致力于馬鈴薯y病毒組的抗病基因研究,，通過不同基因編輯處理方法,，驗(yàn)證抗病毒分子機(jī)制。相關(guān)研究中,，研究人員利用FluorCam多光譜熒光成像系統(tǒng)的GFP熒光蛋白成像功能,，定量分析感染面積與病毒積累量，從而直觀地反映了不同基因功能對(duì)擬南芥病毒抗性的影響,。同時(shí),，葉綠素?zé)晒獬上駝t反映病毒對(duì)光合系統(tǒng)的損傷，同步提供植物的光合表型信息,。

 

 

參考文獻(xiàn)：

§   Zafirov D, et al. 2021. When a knockout is an Achilles' heel: Resistance to one potyvirus species triggers hypersusceptibility to another one in Arabidopsis thaliana. Mol Plant Pathol. 22: 334–347

§   Bastet A, et al. 2019. Mimicking natural polymorphism in eIF4E by CRISPR‐Cas9 base editing is associated with resistance to potyviruses. Plant Biotechnology Journal 17: 1736–1750

§   Bastet A, et al. 2018. Trans-species synthetic gene design allows resistance pyramiding and broad-spectrum engineering of virus resistance in plants. Plant Biotechnology Journal: 1–13

 

2. 不同顏色凌霄葉片的葉綠素?zé)晒馀c紫外激發(fā)多光譜熒光成像分析（易科泰EcoTech?實(shí)驗(yàn)室）

 

                                                                                RGB彩色成像                                                            最大光化學(xué)效率Fv/Fm

 

非光化學(xué)淬滅系數(shù)NPQ                                              次生代謝物熒光F520（多酚,、黃酮等）

 

產(chǎn)地：歐洲