時(shí)間:2022-05-26
作者:易科泰
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簡介:
常見的媒介生物包括蚊,、蠅,、鼠,、蟑螂,、臭蟲,、虱子,、跳蚤,、螞蟻,、蜱等,。受全球氣候變化等影響,媒介生物增加了人畜共患病的傳播風(fēng)險(xiǎn),,引起了全社會的重視和關(guān)注,。媒介生物在長期的宿主-病原體協(xié)同進(jìn)化中形成了特殊的生理生態(tài)適應(yīng)性和耐受性,由此為媒介生物傳染性疾病致病機(jī)制和防控的研究衍生出復(fù)雜的生命科學(xué)問題,。
高通量高分辨率媒介生物呼吸表型監(jiān)測系統(tǒng)是由世界知名的美國Sable Systems International動物呼吸代謝測量公司生產(chǎn)的一款高通道(16,、32通道可選)、高分辨率及自動化的媒介生物呼吸表型監(jiān)測儀器,,能夠監(jiān)測媒介個(gè)體或群體的實(shí)時(shí)氧氣消耗,、二氧化碳產(chǎn)量、水汽代謝,、活動強(qiáng)度等參數(shù),,可廣泛用于媒介生物從蟲卵、幼體到成體的全齡段呼吸與活動模式,、代謝機(jī)理和控制策略研究,,以應(yīng)對各類潛在媒介生物疾病傳播風(fēng)險(xiǎn)。
媒介生物呼吸表型系統(tǒng)作為媒介生物呼吸生理學(xué)研究控制與監(jiān)測方面的權(quán)威產(chǎn)品,,主要具備以下特點(diǎn):
1.改變了傳統(tǒng)的單只個(gè)體的封閉或半封閉式測量模式,,實(shí)現(xiàn)每個(gè)測量室都有實(shí)時(shí)氣流通過的完全開放式測量,避免了測量時(shí)內(nèi)出現(xiàn)缺氧(hypoxia)或高碳酸血癥(hypercapnia),,可一次測量多達(dá)16只個(gè)體,。
2.真正測量媒介個(gè)體的呼吸模式和行為規(guī)律,使得科學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果值得信賴,,高效指導(dǎo)實(shí)踐應(yīng)用,。
3.快至15秒就可以完成一只個(gè)體的代謝監(jiān)測,,這代表了目前技術(shù)的最高水平。
4.數(shù)據(jù)可以通過SD卡(最大支持32G)把帶時(shí)間標(biāo)簽的CSV格式直接導(dǎo)出或記錄到計(jì)算機(jī)進(jìn)一步分析,。如下圖顯示:以果蠅為實(shí)驗(yàn)對象,,測試個(gè)體在10小時(shí)內(nèi)(N=16)多路復(fù)用系統(tǒng)監(jiān)測下的1秒活動強(qiáng)度。從活動強(qiáng)度值和二氧化碳產(chǎn)量(VCO2)曲線中可識別出實(shí)驗(yàn)對象休息和活動時(shí)間的能力,,以及VCO2隨活動水平的變化,。此外,曲線數(shù)據(jù)也顯示了個(gè)體活動隨光周期變化的規(guī)律(引自https://www.sablesys.com/products/classic-line/maven_ft/),。
5. 可選配媒介生物行為(包括活動軌跡,、運(yùn)動距離、取食傾向等2D或3D行為監(jiān)測),、氣體(氧氣,、二氧化碳、水汽以及其它可檢測氣體),、熱成像監(jiān)測,,以及珀?duì)栙N溫控等單元。
6. 最專業(yè)的參考文獻(xiàn)案例,,屬于前沿科技,。
主要性能指標(biāo):
1.氣流流速:5毫升/分鐘-200毫升/分鐘,質(zhì)量流量計(jì),,PID精確控制,,精度為2%,或定制其它量程,。
2.測量時(shí)間:15秒-3小時(shí)可程序化選擇,;基線測量時(shí)間:15秒-3小時(shí)可程序化選擇,。
3.氣壓測量:分辨率1Pa,,精度0.05%。
4.光照水平:0.1-5000勒克斯,。
5.溫度測量:0-50℃,,分辨率0.01℃,精度±0.25℃,。
6.模擬輸入:6個(gè)模擬輸入,,16bit分辨率,-5至+5伏電壓信號,,可接SSI其它儀器或?qū)嶒?yàn)室其它氣體分析儀等,。
7.雙通道高精度差分式氧氣分析測量儀:燃料電池原理氧氣傳感器,氧氣濃度量程0-100%,,精度0.1%,,分辨率0.0001%,,響應(yīng)時(shí)間小于7秒,24小時(shí)漂移<0.01%,,溫度,、壓力自動補(bǔ)償;
8.超高精度二氧化碳分析測量儀:用于測量微小昆蟲(比如果蠅,、蚊子等)或蜱螨類微小動物的呼吸代謝,,可同時(shí)測量CO2濃度和H2O濃度;CO2量程0-3000ppm,;準(zhǔn)確度<1%,;分辨率0.01ppm;H2O量程0-60mmol/mol,;準(zhǔn)確度1%,;
9.二次抽樣單元:內(nèi)置氣泵、精密針閥,、質(zhì)量流量計(jì),,可用來給氣流樣本做二次抽樣,也可單獨(dú)作為氣源使用,;流量范圍5-2000mL/min,;精度為讀數(shù)的10%;分辨率1mL/min,;具備2行顯示LCD顯示屏,;帶0-5V BNC模擬信號輸出;數(shù)字輸出RS-232,;供電12-15VDC,,20-350mA,配交流電適配器,;工作溫度:0-50℃,,無冷凝;重量1.5kg,;尺寸16cm×13cm×20cm,;
產(chǎn)地:美國
應(yīng)用案例1
美國狗蜱是落基山斑疹熱的主要媒介,由立克次體細(xì)菌(Rickettsiae)引起,。落基山斑疹熱的癥狀包括高燒,、發(fā)冷、肌肉酸痛和頭痛,。在某些情況下,,它通常在發(fā)燒開始后2-4天發(fā)展可能成皮疹擴(kuò)散到四肢。這種疾病如果不及時(shí)治療,,就會是致命的,。另一種傳播疾病是土拉菌病,,這是由土拉弗朗西斯菌(Francisella tularensis)引起的,可通過兔子,、小鼠,、松鼠和其他小動物傳播,癥狀包括發(fā)熱,、寒戰(zhàn)和淋巴結(jié)壓痛,。蜱叮咬部位可能形成潰瘍。此外,,美國狗蜱會導(dǎo)致蜱麻痹,,從而導(dǎo)致受影響的人出現(xiàn)嚴(yán)重的呼吸窘迫和肌肉無力。
作為強(qiáng)制性的吸血?jiǎng)游?,它們的大部分生命時(shí)間都是在遠(yuǎn)離宿主的環(huán)境中度過無食物狀態(tài),,因而成功存活對它們至關(guān)重要;然而學(xué)界對蜱蟲饑餓耐受性的潛在生理和分子機(jī)制知之甚少,。美國辛辛那提大學(xué)蜱蟲教授Andrew J. Rosendale對雌性美國狗蜱的生物能量,,轉(zhuǎn)錄組學(xué)和行為變化等進(jìn)行了研究,其中能量代謝實(shí)驗(yàn)通過SSI高分辨率呼吸代謝系統(tǒng)監(jiān)測CO2產(chǎn)量,。蜱蟲因?yàn)榇x率較低,,在實(shí)驗(yàn)過程中,每只蜱蟲放置在200微升的呼吸室中,,推氣的氣流設(shè)置在30毫升/分鐘,,從呼吸室出來的氣流進(jìn)入多通道氣路切換器,之后進(jìn)入高精度二氧化碳分析儀進(jìn)行氣體監(jiān)測,,并經(jīng)過軟件分析處理得到每個(gè)蜱蟲不同饑餓時(shí)間后的代謝率(Rosendale A J et al, 2018),。
上圖實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,雌性美國狗蜱在饑餓期內(nèi)隨著饑餓時(shí)間延長其代謝率呈2倍增加趨勢,。在24小時(shí)的蜱蟲活動時(shí)間內(nèi),,總體而言,饑餓影響了其活動水平,,饑餓36周的活動水平顯著高于1,、4和12周(A),,這種差異主要由實(shí)驗(yàn)開始早期的活動量導(dǎo)致(B),但在實(shí)驗(yàn)后期無明顯差異(C),;饑餓36周的狗蜱移動到搜尋位置比剛飼喂個(gè)體少2.4倍時(shí)間(D)。研究認(rèn)為,,隨著蜱蟲饑餓持續(xù),,它會利用糖原、脂質(zhì),,以及生命后期的蛋白質(zhì)作為能量儲備,,通過蛋白酶解和自噬促進(jìn)內(nèi)源性營養(yǎng)物質(zhì)的調(diào)動,;代謝率隨著饑餓持續(xù)增加,饑餓的蜱蟲更有可能增加宿主搜尋行為,。
應(yīng)用案例2
昆蟲體內(nèi)可遺傳共生的微生物對其性狀和適應(yīng)性有廣泛的影響,,包括操縱繁殖,提供營養(yǎng),,改變耐熱性和抵御病原體,。微生物也可能改變宿主行為。在極端情況下,,寄生微生物可以誘導(dǎo)增加傳播可能性的行為,,例如將宿主引導(dǎo)到促進(jìn)傳播的棲息地。作為抗感染的免疫策略,,受感染的宿主也可能改變自己的行為,,包括尋求溫暖的溫度以誘發(fā)“行為發(fā)熱”或減少活動并增加睡眠時(shí)間。這種行為改變對微生物傳播和宿主健康具有重要意義,。
沃爾巴克氏體Wolbachia是一類廣泛分布于陸生節(jié)肢動物體內(nèi)的細(xì)胞內(nèi)共生菌,,可通過雌性宿主的卵傳遞給子代,感染了大約一半的昆蟲物種,。加拿大蒙大拿大學(xué)生物科學(xué)系Michael T. J. Hague教授通過評估14個(gè)不同的沃爾巴克氏體菌株感染9種果蠅后的宿主運(yùn)動活動性影響來檢驗(yàn)沃爾巴克體改變宿主行為的假設(shè)(Michael et al., 2021),。在宿主運(yùn)動活動性測試實(shí)驗(yàn)中,使用16通道流通式呼吸測定和數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)(MAVEn,,Sable Systems International)測量了實(shí)驗(yàn)果蠅的運(yùn)動活動,。該系統(tǒng)含有16個(gè)2.4 ml的聚碳酸酯動物測量室和一套活動檢測器,其中活動檢測器使用對果蠅不可見的紅外光以1 Hz采樣頻率來監(jiān)測每個(gè)測量室中的動物活動原始值并轉(zhuǎn)換為活動指數(shù)絕對差和(Absolute Difference Sums,,ADS),。文中結(jié)果使用3小時(shí)內(nèi)的平均ADS作為每只果蠅的運(yùn)動活動的評估值。
實(shí)驗(yàn)中共測定了3104只蒼蠅的運(yùn)動活性,結(jié)果見上圖(Figure 1. 每個(gè)基因型每個(gè)性別未感染和感染果蠅的活動值),。
沃爾巴克氏體對六種宿主基因型的活動性有顯著影響(上圖Figure 2),,包括感染了A組和B組沃爾巴克氏體的果蠅宿主。另外,,沃爾巴克氏體對宿主活動的影響方向因基因型和性別而異,。
研究結(jié)果支持了沃爾巴克氏體對宿主行為有廣泛影響的觀點(diǎn)。這些行為改變的適應(yīng)性后果對于理解宿主-共生體相互作用的進(jìn)化非常重要,,包括沃爾巴克氏體如何在宿主種群中傳播,。
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